Таза Saposhnikovia divaricata майы шам жана самын жасоо үчүн оптом диффузор эфир майы камыш күйгүзүүчү диффузорлор үчүн жаңы

Шам жана самын жасоо үчүн таза Saposhnikovia divaricata майы оптом диффузор эфир майы камыш күйгүзүүчү диффузорлор үчүн жаңы.

кыскача сүрөттөмө:

2.1. SDE даярдоо

SD тамыры кургатылган чөп катары Hanherb Co. (Гури, Корея) сатып алынган. Өсүмдүк материалдары Кореянын Чыгыш медицина институтунун (КИОМ) доктору Го-Я Чой тарабынан таксономиялык жактан тастыкталган. Ваучердин үлгүсү (саны 2014 SDE-6) Корей гербарийинин стандарттык чөп ресурстарына салынган. SD (320 г) кургатылган ризомдары эки жолу 70% этанол менен (2 сааттык рефлюкс менен) экстракцияланган жана андан кийин экстракты төмөндөтүлгөн басымда концентрацияланган. Кайнатма чыпкаланган, лиофилизацияланган жана 4°С температурада сакталган. Чийки баштапкы материалдардан кургатылган экстракттын чыгышы 48,13%ды (w/w) түздү.

2.2. Сандык жогорку натыйжалуу суюктук хроматографиясы (HPLC) анализи

Хроматографиялык анализ HPLC системасы (Waters Co., Milford, MA, АКШ) жана фотодиод массивинин детектору менен жүргүзүлдү. SDEнин HPLC анализи үчүн, при-O-glucosylcimifugin стандарты Кореянын Салттуу Медицина индустриясын илгерилетүү институтунан (Кёнсан, Корея) сатылып алынган жанасек-О-глюкозилхамаудол жана 4′-O-β-D-глюкозил-5-O-methylvisamminol биздин лабораторияда бөлүнүп жана спектралдык анализдер менен, биринчи кезекте, ЯМР жана MS тарабынан аныкталган.

SDE үлгүлөрү (0,1 мг) 70% этанолдо (10 мл) эриди. Хроматографиялык бөлүү XSelect HSS T3 C18 тилкеси (4,6 × 250 мм, 5) менен аткарылган.μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Мобилдик фаза ацетонитрилден (А) жана суудагы (B) 0,1% уксус кислотасынан 1,0 мл/мин агымда турган. Көп баскычтуу градиент программасы төмөнкүдөй колдонулган: 5% A (0 мин), 5–20% A (0–10 мин), 20% A (10–23 мин) жана 20–65% A (23–40 мүн.) ). Тактоо толкун узундугу 210–400 нмде сканерленген жана 254 нмде жазылган. Инъекциянын көлөмү 10,0 болгонμL. Үч хромонду аныктоо үчүн стандарттуу эритмелер 7,781 мг/мл акыркы концентрациясында даярдалган (прим-O-glucosylcimifugin), 31,125 мг/мл (4′-O-β-D-глюкозил-5-O-метилвисамминол) жана 31,125 мг/мл (сек-О-глюкозилхамаудол) метанолдо жана 4°Сде кармалат.

2.3. Сезгенүүгө каршы активдүүлүктү баалооIn Vitro

2.3.1. Клетка маданияты жана үлгү менен дарылоо

RAW 264,7 клеткалары Америкалык типтеги Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, АКШ) алынган жана 1% антибиотиктерди жана 5,5% FBS камтыган DMEM чөйрөсүндө өстүрүлгөн. Клеткалар 37°С 5% СО2 нымдалган атмосферада инкубацияланган. Клеткаларды стимулдаштыруу үчүн чөйрө жаңы DMEM чөйрөсү жана липополисахарид (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, MO, АКШ) менен алмаштырылды.μг/мл SDE бар же жок болгон учурда кошулган (200 же 400μг/мл) кошумча 24 саатка.

2.3.2. Азот кычкылы (NO), простагландин E2 (PGE2), шишик некроз фактору-α(TNF-α), жана Интерлейкин-6 (ИЛ-6) өндүрүшү

Клеткалар SDE менен дарыланып, 24 саат бою LPS менен стимулдашты. NO өндүрүшү мурунку изилдөөгө ылайык Griess реагентинин жардамы менен нитритти өлчөө жолу менен талданды.12]. PGE2, TNF- сезгенүү цитокиндерин бөлүп чыгарууα, жана IL-6 чыгаруучу көрсөтмөлөрүнө ылайык ELISA комплекти (R&D системалары) менен аныкталган. SDEнин NO жана цитокин өндүрүшүнө тийгизген таасири Wallac EnVision аркылуу 540 нм же 450 нмде аныкталган.™микропластинаны окугуч (PerkinElmer).

2.4. Антиостеоартриттин активдүүлүгүн баалооIn Vivo

2.4.1. Жаныбарлар

Эркек Sprague-Dawley келемиштери (7 жумалык) Samtako Inc. компаниясынан (Осан, Корея) сатылып алынган жана 12 сааттык жарык/караңгы цикл менен көзөмөлдөнгөн шарттарда багылган.°C жана% нымдуулук. Келемиштерге лабораториялык диета жана суу берилдиad libitum. Бардык эксперименталдык процедуралар Улуттук Саламаттыкты сактоо Институтунун (NIH) көрсөтмөлөрүнө ылайык аткарылган жана Дэжон университетинин (Теджон, Корея Республикасы) Жаныбарларга кам көрүү жана пайдалануу комитети тарабынан бекитилген.

2.4.2. Келемиштерде MIA менен ОА индукциясы

Жаныбарлар рандомизацияланган жана изилдөө башталганга чейин дарылоо топторуна дайындалган (топ үчүн). МИА эритмеси (3 мг/50μ0,9% туздуу L) кетамин жана ксилазин аралашмасы менен индукцияланган наркоздун астында оң тизенин муун ичиндеги мейкиндигине түздөн-түз сайылган. Келемиштер туш келди төрт топко бөлүнгөн: (1) ИИМ инъекциясы жок туздуу топ, (2) ИИМ инъекциясы бар ИИМ тобу, (3) SDE менен дарыланган топ (200 мг/кг) ИИМ инъекциясы менен жана (4) ) indomethacin- (IM-) дарыланган топ (2 мг/кг) МИА сайынуу менен. келемиштер 4 жума бою MIA сайынуу алдында 1 жума мурун SDE жана IM менен оозеки кабыл алынган. Бул изилдөөдө колдонулган SDE жана IM дозасы мурунку изилдөөлөрдө колдонулгандарга негизделген [10,13,14].

2.4.3. Hindpaw салмакты бөлүштүрүүнүн өлчөөлөрү

ОА индукциясынан кийин арткы буттардын салмак көтөрүү жөндөмдүүлүгүндөгү баштапкы тең салмактуулук бузулган. Салмак көтөрүү толеранттуулугундагы өзгөрүүлөрдү баалоо үчүн жөндөмсүздүктү сынагыч (Linton инструменти, Норфолк, Улуу Британия) колдонулган. Келемиштер кылдаттык менен өлчөө камерасына жайгаштырылды. Арткы буттун салмагын көтөрүү күчү 3 секунд аралыгында орточо алынган. Салмагын бөлүштүрүү катышы төмөнкү теңдеме менен эсептелген: [оң арткы буттагы салмак/(оң арткы буттагы салмак + сол арткы буттагы салмак)] × 100 [15].

2.4.4. Сывороткадагы цитокиндердин деңгээлин өлчөө

Кан үлгүлөрү 1500 г центрифугада 10 мүнөт 4°C; андан кийин сыворотка чогултулган жана колдонууга чейин -70 ° C сакталган. ИЛ-1 денгээлдериβ, IL-6, TNF-α, жана сывороткадагы PGE2 өндүрүүчү нускамаларына ылайык R&D Systems (Миннеаполис, MN, АКШ) фирмасынын ELISA комплекттери аркылуу өлчөнгөн.

2.4.5. Реалдуу убакытта сандык RT-PCR талдоо

Жалпы РНК тизе муунунун тканынан TRI реагентин® (Сигма-Олдрих, Сент-Луис, МО, АКШ) жардамы менен алынган, cDNAга тескери транскрипцияланган жана SYBR жашыл (Applied Biosystems) менен TM One Step RT ПТР комплектинин жардамы менен ПЦР күчөтүлгөн. , Гранд-Айленд, NY, АКШ). Реалдуу убакыттагы сандык ПТР Applied Biosystems 7500 Real-Time ПТР системасын колдонуу менен аткарылган (Applied Biosystems, Гранд-Айленд, NY, АКШ). Праймер ырааттуулугу жана зонд ырааттуулугу Таблицада көрсөтүлгөн1. Үлгү cDNAs аликвоттору жана бирдей сандагы GAPDH cDNA өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык ДНК полимеразаны камтыган TaqMan® Universal PCR мастер аралашмасы менен күчөтүлгөн (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). ПТР шарттары 50 ° C 2 мүнөт, 94 ° C 10 мин, 95 ° C 15 сек, жана 40 цикл үчүн 60 ° C 1 мүнөт болгон. Максаттуу гендин концентрациясы өндүрүүчүнүн көрсөтмөлөрүнө ылайык, салыштырма Ct (күчөтүү графиги менен босогонун ортосундагы кайчылаш чекиттеги босого цикл саны) ыкмасы менен аныкталган.

FOB баасы:US $0,5 - 9,999 / даана

Минималдуу буйрутма саны:100 Piece/Pieces

Камсыздоо мүмкүнчүлүгү:10000 даана / айына

Бизге электрондук кат жөнөтүңүз

Продукт чоо-жайы

Продукт тегдери

Остеоартрит (ОА) – бул эң көп кездешкен таяныч-кыймыл аппаратынын бузулушу жана улгайган адамдардын эң кеңири тараган дегенеративдик муун оорусу.1]. ОА – жарым-жартылай жаракаттан, кемирчектин структурасын жана функциясын жоготуудан, ошондой эле сезгенүүгө каршы жана сезгенүүгө каршы жолдордун бузулушунан келип чыккан шарт.2,3]. Ал биринчи кезекте муун кемирчегин жана синовиалдык муундардын субхондралдык сөөктөрүн жабыркатат жана муундардын иштебей калышына алып келет, бул оорууну көтөрүүдө, анын ичинде басууда жана турганда ооруга алып келет.4].

ОАнын эч кандай дабасы жок, анткени кемирчекти жок кылгандан кийин аны калыбына келтирүү өтө кыйын.5]. Дарылоонун максаттары - ооруну басаңдатуу, муундардын кыймылдуулугун сактоо же жакшыртуу, муундардын күчүн жогорулатуу жана оорунун майып кылуучу таасирин азайтуу. ОАнын фармакологиялык дарылоосу оорулуунун биргелешкен функциясын жана жашоо сапатын жогорулатуу үчүн ооруну азайтууга багытталган. Кемирчектин бузулушу ОАдагы негизги окуя болсо да, коллагендин деградациясы сезгенүү менен бирге ОАнын кайтарылгыс прогрессиясын аныктаган негизги окуя болуп саналат.6,7]. сезгенүүгө каршы жана chondroprotective иш менен дарылоо ооруну басаңдатуу жана OA бейтаптарда матрицанын бүтүндүгүн сактоо үчүн күтүлүүдө.

Ошондуктан, сезгенүүнү азайтуу, кыязы, OA башкарууда пайдалуу болот. Акыркы изилдөөлөр муундар менен байланышкан ткандар менен өз ара аракеттенүү аркылуу хондроциттердин сезгенүүсүн басаңдатуу жана кемирчекти андан ары жок кылуу жагынан ОАнын прогрессиясында чөп ресурстарын коргоочу ролду сунуштайт, натыйжада муундардын оорушу басаңдайт.8].

тамырыSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) Кореяда жана Кытайда баш ооруну, ооруну, сезгенүүнү жана артритти дарылоодо салттуу медицинада кеңири колдонулат.9,10]. ар түрдүү фармакологиялык таасирлериSaposhnikovia divaricata(SD) ошондой эле сезгенүүгө каршы, ооруну басуучу, антипиретикалык жана антиартриттик касиеттерди камтыйт.9,11]. Жакында жүргүзүлгөн изилдөө SD хромон экстракты коллаген менен шартталган артриттин чычкан моделинде антиревматоиддик артриттин потенциалдуу таасирлерине ээ экенин көрсөттү.10]; бирок, сезгенүүгө каршы жана артритке каршы активдүүлүгүн колдоо үчүн бир нече изилдөөлөр жүргүзүлгөнSaposhnikovia divaricataкөчүрмө (SDE).

Ошондуктан, бул изилдөө SD бир 70% этанол экстракты сезгенүүгө каршы жана antiosteoarthritis иш-аракеттери изилденген. Биринчиден, SDE сезгенүүгө каршы таасири бааланганin vitroLPS-индукцияланган RAW 264,7 клеткаларында. Андан кийин, SDE антиостеоартриттик таасири салмакты бөлүштүрүү, муун кемирчектин бузулушу жана мононатрий йодоацетатын (MIA-) индукцияланган ОАнын келемиш моделинде сезгенүү реакцияларын баалоо менен ченелген.